www.brydzyk.fora.pl
BRYDŻ DLA DREWNIAKÓW
» FAQ
» Szukaj
» Użytkownicy
» Grupy
» Galerie
» Rejestracja
» Profil
» Zaloguj się, by sprawdzić wiadomości
» Zaloguj
Forum www.brydzyk.fora.pl Strona Główna
->
Dyskusje brydżowe
Napisz odpowiedź
Użytkownik
Temat
Treść wiadomości
Emotikony
Więcej Ikon
Kolor:
Domyślny
Ciemnoczerwony
Czerwony
Pomarańćzowy
Brązowy
Żółty
Zielony
Oliwkowy
Błękitny
Niebieski
Ciemnoniebieski
Purpurowy
Fioletowy
Biały
Czarny
Rozmiar:
Minimalny
Mały
Normalny
Duży
Ogromny
Zamknij Tagi
Opcje
HTML:
NIE
BBCode
:
TAK
Uśmieszki:
TAK
Wyłącz BBCode w tym poście
Wyłącz Uśmieszki w tym poście
Kod potwierdzający: *
Wszystkie czasy w strefie EET (Europa)
Skocz do:
Wybierz forum
BRYDŻ DLA DREWNIAKÓW
----------------
Przywitaj się brydżysto / brydżystko
Dyskusje brydżowe
Przegląd tematu
Autor
Wiadomość
defgf96tj
Wysłany: Wto 5:45, 08 Mar 2011
Temat postu: ugg boots España p27、p53蛋&
p27、p53蛋白在口腔鳞癌中的表达和意义
凋亡起到干预作用。本实验用6.羟基多巴胺作用于NGF诱导后PC12细胞,建立帕金森病细胞模型,用RNAi方法对Fas基因表达进行抑制,从而观察该方法以帕金森病细胞凋亡的影响。1材料和方法1.1细胞培养和诱导PC12细胞于完全培养液(RP1640+15%新生牛血清+青霉素)中培养,每3d换液1次,5—6d传代1次。取对数生长期PC12细胞,
ugg boots España
,消化、离必后用完全培养基重悬,密度为lO5·mL-1待80%汇合时吸去1日的培养液,加入新培养液备用。成熟的PC12细胞接种于到含有50nIIll(约2nmol·L-1)NGF的完全DMEM培养液中,使细胞密度达到2.5—1O×lO4·cm一,每2—3天换液一次,约一周左右形成神经纤维,并且持续培养1O天,成为类神经细胞。1.2实验分组及传染将细胞分为完全培养液对照组、模型组、GFPsiRNA(绿色荧光蛋白基因干扰)RNA组;FassiRNA(Fas基因干把)RNA组。细胞转染:试剂由大连宝生物公司提供。将细胞接种于24孔培养板,48h后细胞融合达46—6o%进行传染。每组设1O个样本,转染24h,进行6.羟基多巴胺处理。1.3建立帕金森病细胞模型取NGF诱导后PC12细胞,消化、离心后用完全培养基重悬,密度lO5·mL~,待8o%汇合时吸去1日的培养液,加入新培养液备用。将模型组与GFPsiRNA组;FassiRNA组细胞接种于162cII组织培养板中,待细胞巾壁成单层后,去上清,加入6.羟基多巴胺培养24h后进行Fk、Caspase-3表达及细*通讯作者胞凋亡相关检测。1.4GsiRNA和Fas序列Fas5’P.AUACAUCCCGAGAAUUGCUdrdr.3’(sense),5’.P.AGCAAL几JCUCGGGAUGUAUdTdT-3’(anti.sense),GFP5’P.GGCUACGUCCAGGAGCGCACG-3’(F~tkqe)5’P.UGCGCUCCUGACGUAGCCUU-3(anfisense).(试剂购自大连宝生物公司)1.5'IIJNEL法检测细胞凋亡脱氧核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记法(-I1『NⅡ,)用细胞凋亡试剂盒(罗氏公司)。细胞用40g/L多聚甲醛固定24h,常规石蜡包埋、切片。步骤按细胞凋亡试剂盒说明书进行。结果判断:细胞核被染成棕黄色为阳性。每张切片在400倍高倍视野下随机取2o个视野,计数阳性细胞数。1.6流式细胞仪()分析3IIll培养液含5×105个细胞培养于6孔板,PBS液洗涤2遍,再用预冷的体积分数70%乙醇固定,4"12过夜,采用H(50ms/L)染色分析亚二倍体峰,
ugg boots günstig
,分析细胞凋亡比例,
tory burch outlet
。重复实验1O次。1.7FCIVl检测Fas、Caspase-3表达取细胞悬液(约lxlo6个/m1),低速离心除去固定液,PBS洗两次。抗Fas、Caspase-3抗体的标记采用间接荧光免疫法。将上述制备好的单细胞悬液用PBS洗两次,
converse pas cher
,分别用加入1:200稀释的特异性抗体5O,37℃水浴30min,离心弃上清,
ghd deutschland
,加入1:200稀释的F~G4gG100,37"12水浴30rain,离心弃上清,PBS洗1次以去除未结合的荧光抗体。上机前加入1mlPBS,400目筛网过滤,上机分析。F鹊、Caspase-3蛋白表达量以平均荧光强度表示。1.8统计方法计量资料描述采用均数±标准差,用SPSS12.0对数据进行统计学处理。2结果2.11【1胍染色结果'RJNEL染色显示凋亡的细胞核内有分布均匀的深蓝色
More articles related to topics:
ghd deutschland 宫颈机能不全致习惯性早产3例诊治体
ugg pas cher 不同充填材料应用于山羊经皮椎体成形术
moncler sito ufficiale MRP1/CD9蛋白在人肝细胞癌中
fora.pl
- załóż własne forum dyskusyjne za darmo
Powered by
phpBB
© 2001, 2005 phpBB Group
subMildev
free theme by
spleen
&
Programosy
Regulamin